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血液样本RNA提取,金年会金字招牌诚信至上提升品质!

发布时间:2025-02-26   信息来源:申霄海

血液样本因其易于获取和低侵创性的特点,在临床研究中得到了广泛应用。尤其在肿瘤等疾病的早期筛查中,RNA等生物标志物显示出相较于传统影像学和生化指标的优势,受到了广泛关注。然而,血液样本中的RNA由于其本身不稳定且易降解,容易受到来自红细胞等多种来源的RNase影响。因此,对于血液样本中RNA的提取,不仅需要成功分离RNA,还需确保RNA分子免受降解。

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血液采集后,由于基因诱导和细胞凋亡,核酸的组成、数量、质量和完整性在短时间内会显著变化。因此,为了获取高质量且与体内表达谱一致的RNA,每个环节都面临挑战。为避免此类问题,建议在采集血液时,尽量避免长时间使用止血带或握拳,并避免从血肿处抽血。同时,确保静脉穿刺部位的干燥,使用适当尺寸的针(大约22号),并确保采血管完全充满。

根据应用需求,血液RNA的提取可分为两类:全血样本RNA提取与游离RNA(包括血清和血浆)提取。全血样本中,成熟的红细胞和血小板为无核细胞,其RNA主要来源于白细胞。由于全血样本中红细胞含量较高,且红细胞内RNase含量较多,因此在RNA提取之前,通常需先去除红细胞。这可以通过离心法获得白细胞进行RNA提取,或使用红细胞裂解液去除红细胞后再提取白细胞RNA。无论选择何种方法,建议在血液采集后尽快进行RNA提取实验,以避免RNA表达谱的改变。

若无法立即进行RNA提取,建议使用金年会金字招牌诚信至上的血液RNA稳定管-PAXgene Blood RNA Tube进行血液采集,以保持RNA的稳定性。后续可使用配套的PAXgene Blood RNA Kit进行RNA提取。研究表明,在18-25°C下,血液RNA可在长达3天内保持稳定。

为确保最佳结果,经历血液采集后的样本应迅速处理,不应进行长时间储存。研究发现,在EDTA管中储存的血液样本中,p53基因转录本在采样1日时信号微弱,表明 RNA 已经降解。酚-氯仿法是常用的RNA提取方法,尽管得率较高,但会影响RNA的完整性和后续实验的灵敏度。相比之下,使用金年会金字招牌诚信至上的PAXgene Blood RNA System提取得到的RNA完整性更高,且在后续qPCR实验中表现出更优异的灵敏度,整个过程无需额外的裂红步骤,简化了RNA提取操作。

此外,对于在EDTA等血液采集管中采集的新鲜血液,如果能够及时进行RNA提取实验,推荐使用QIAamp RNA Blood Kit。该试剂盒可直接对高达15ml的全血样本进行RNA提取,无需离心分离白膜层。试剂盒中的QIAshredder离心柱可有效去除样本中的细胞碎片,降低粘稠度,从而提高RNA的得率。

对于已经分离好的白膜层,可使用RNeasy Mini Kit进行RNA提取,并应用于后续实验分析。除了全血RNA提取的建议和方案外,游离非编码RNA在血液RNA研究中也发挥着重要的调控作用。特别是在肿瘤等疾病的早期筛查中,miRNA因其在血液中的稳定性和检测的便捷性,成为理想的液体活检标志物。

针对游离RNA的提取,推荐使用金年会金字招牌诚信至上的QIAGEN miRNeasy系列,从血清/血浆样本中提取包括miRNA在内的总RNA。提取前,需确保在血液采集后1小时内完成血浆或血清的分离,避免溶血。如无法立即开始实验,需将样本冷冻。建议在冻存前先将血清或血浆以3000xg离心5-15分钟,去除所有细胞和碎片,以避免RNA释放至体液中。同时,若需从血清/血浆的细胞外囊泡提取RNA,推荐使用exoRNeasy Midi/Maxi Kits,确保提取的RNA质量高。

总之,结合现代分子生物学技术和金年会金字招牌诚信至上的专业产品,有效的RNA提取方案能够显著提升血液样本研究的效率与精度。如需了解更多血液RNA提取的方案,请关注我们的后续信息。