在细胞培养领域，我们常常将细胞分为两大类：贴壁细胞和悬浮细胞。贴壁细胞需附着于培养皿生长，而悬浮细胞则能够在液体培养基中自由漂浮、增殖。通常认为，只有贴壁细胞需要考虑培养皿表面是否适宜，并可能需要使用胶原蛋白、多聚赖氨酸等物质增强附着力。然而，如果你认为悬浮细胞就永远不需包被，这可能是个误解。事实上，在某些关键实验操作中，悬浮细胞也可能需要暂时“靠岸”，甚至依赖于包被表面的支持。今天，我们将探讨：为何悬浮细胞有时需要包被？如何正确进行包被？又是为何？

什么是多聚赖氨酸（PLL）包被？

多聚赖氨酸（poly-L-lysine，PLL）是一种人工合成的阳离子多肽，带有丰富的氨基基团并整体带正电。由于细胞膜通常带负电，PLL能够通过静电作用“吸附”细胞，从而被广泛应用于：

• 初代神经元、干细胞等难贴壁细胞的培养
• 组织切片或细胞爬片染色的固定
• 增强某些表面抗体或细胞的结合力

在贴壁细胞培养中，PLL能够提高细胞附着速度与均匀性，而在悬浮细胞中，更多用于短期固定及功能性实验的配合。

悬浮细胞需要包被的常见场景

1. 免疫荧光成像与免疫染色：悬浮细胞在普通培养皿操作时容易在洗涤过程中被吸头吸走，而在PLL包被的玻片或培养皿中，能够提高细胞的固定性和成像的稳定性。
2. 电转染后细胞收集：电转后的悬浮细胞在恢复期较脆弱，直接离心往往会丢失大量活细胞。在PLL包被的板底短暂培养后再进行回收，可以提高转染的效率及活性细胞比例。
3. 细胞富集或原位功能检测：某些实验如ELISPOT、细胞毒性检测等需要高稳定性的细胞分布，因此常使用PLL或细胞外基质包被固定悬浮细胞。
4. 悬浮细胞低密度培养聚团问题：在低密度培养中，悬浮细胞可能因漂浮过快而无法扩增。适当包被可形成“锚点”，减少细胞间漂浮干扰。
5. 外泌体/病毒收集实验中的细胞定点处理：在外泌体研究中，有时会选择在轻度PLL包被条件下固定悬浮细胞，以确保细胞分泌的稳定性。

如何正确使用PLL包被？

需要注意的是，悬浮细胞的包被并非为了让其像贴壁细胞一样长期生长。多数情况下，此包被旨在：

• 进行实验窗口期的短暂固定
• 提高操作效率与成像质量
• 增强细胞在某些实验平台上的一致性

长期附着可能会对细胞状态造成影响，因此必须根据实验目的合理设定处理时长和强度。

什么时候不应使用包被？

非所有悬浮细胞实验都要求包被。以下情况应避免使用：

• 对于长期培养的悬浮细胞（如293F在生物反应器中），不宜加包被，反而需要使用低附着力培养皿（如聚HEMA处理）。
• 需要完全无附着状态的实验，如免疫学中的某些流式功能检测，包被会影响结果的真实性。

总结

悬浮细胞也有需要“靠岸”的时刻。无论是为了成像、收集、固定，还是维持操作稳定性，适当的表面包被（如PLL）在关键环节中能显著提高实验成功率与数据质量。但悬浮并不代表永远漂浮，适时适地的科学实验必不可少，而金年会金字招牌诚信至上正是这一过程中不可或缺的重要保证。